一種GFP抗體制備方法及其DNA序列

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201810839332.7 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN110759998A 公開(公告)日 2020-02-07
申請(qǐng)公布號(hào) CN110759998A 申請(qǐng)公布日 2020-02-07
分類號(hào) C07K16/18;C12N15/13;C12N15/81 分類 有機(jī)化學(xué)〔2〕;
發(fā)明人 杜孩 申請(qǐng)(專利權(quán))人 深圳康體生命科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 518000 廣東省深圳市龍崗區(qū)南灣街道南新路13號(hào)C棟
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明實(shí)施例提供了一種GFP抗體的制備方法及其DNA序列。該制備方法包括:向羊駝注射包含GFP的免疫原以免疫羊駝;分離免疫羊駝的外周血淋巴細(xì)胞并提取所述外周血淋巴細(xì)胞的RNA;反轉(zhuǎn)錄所述RNA為cDNA并特異性擴(kuò)增cDNA中的抗體基因片段;將抗體基因片段克隆至噬菌體質(zhì)粒并轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞;按照預(yù)設(shè)的比例,向所述感受態(tài)細(xì)胞加入輔助噬菌體,擴(kuò)增和純化所述噬菌體文庫(kù);從所述噬菌體文庫(kù)中篩選洗脫目標(biāo)噬菌體并在畢氏酵母中表達(dá)。其制備獲得的抗體具有分子量小,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的特性,可以有效的減少純化后的下游應(yīng)用中重鏈和輕鏈的污染,并且批次間差異較小。